(这是Hmaide的第篇推送)
毕业南医的H师兄
业余经营，留下一点南方医的痕迹；如果觉得有用，希望师弟师妹考完试后呢，可以给H师兄发一份考试回忆录（选择题、名词解释、简答题、病例分析这些）或者个人的一些备考经验，任何有用的资料都可以；互帮互助，医路共勉！
----感谢兔子inHere的投稿
报告日期-06-25
1.实验目的
（1）学会坐骨神经-腓肠肌标本的制备，学会蟾蜍的基本操作；熟悉PCLab的使用。
（2）通过观察骨骼肌的收缩形式，了解不同刺激强度与频率对神经-肌肉收缩的影响。
（3）明确阈刺激、阈上刺激、阈下刺激、不完全强直收缩、完全强直收缩的概念。
2.材料与方法
2.1材料或/和动物
动物：蟾蜍
材料：
①药品：任氏液
②器材：蛙类手术器械1套，刺蛙针1根，锌铜弓1只，玻璃分针一根，万能支架，生物信号采集系统，张力换能器。
2.2方法
2.2.1坐骨神经—腓肠肌标本的制备
（1）破坏脑脊髓：左手握蟾蜍，食指下压吻端，拇指按压背部，其余三指紧贴腹部，找到枕骨大孔刺入1-2MM，分别捣毁脑组织和脊髓。（脑和脊髓完全被破坏的标志是：呼吸停止，四肢松软并处于对称部位）
（2）剪除躯干上部及内脏：在骶髂关节水平上1厘米处剪短脊柱，去除头，前肢和内脏，保留部分脊柱和下肢。
（3）剥皮：剪去尾骨，剥去剩余组织的皮肤，沿着脊柱正中到耻骨联合将标本剪开，标本放在盛有任氏液的烧杯中。
（4）游离坐骨神经：腓肠肌白色肌腱向上将标本固定于蛙板上，顺着坐骨神经走向用玻璃分针将坐骨神经上方的肌肉分开，至膝关节处，暴露坐骨神经。在坐骨神经起源下1厘米处剪断椎骨，剪去坐骨神经周围的小分支和肌肉，游离坐骨神经。
（5）制成坐骨神经——腓肠肌标本：去除股骨附着的所有大腿肌肉，剪断股骨（保留约1厘米），在跟腱处结扎并游离腓肠肌，将膝关节以下小腿部分全部剪除，剩下即为坐骨神经-腓肠肌标本。
（6）标本检验：用锌铜弓轻轻刺激坐骨神经，腓肠肌收缩即表示标本制备完好。
2.2.2观察肌肉收缩的性质
（1）连接刺激器和记录装置
①将张力换能器和肌槽固定在铁支架上，张力换能器的输出端连接放大器通道Ⅲ。
②以股骨作支点固定，腓肠肌与张力换能器连接，将穿好手术线的坐骨神轻轻提起，放在刺激电极上，并保证接触良好。
（2）刺激强度对肌肉收缩的影响
①Pc_Lab实验项目选择；
②刺激方式用单刺激,刺激电压初始值设为0V，将刺激强度逐步增大（0.04-0.30V,0.5ms），观察肌肉收缩反应出现和相应增大，读出阈刺激和最大刺激强度数值。
（3）肌肉的单收缩和强直收缩
①选用串刺激，串脉冲数选“1”，用最大刺激强度采样，观察波形的高度与宽度。
②选用串刺激，其他参数与单收缩相同，即可进行采样，并及时观察波形变化情况。逐渐增加脉冲数(1,3,6,…,15)，观察肌肉收缩形式的变化。
3.结果与讨论
3.1不同刺激强度刺激坐骨神经对腓肠肌收缩张力的影响
图3-1蟾蜍骨骼肌单刺激结果图（略）
刺激方式采用单刺激,刺激电压初始值设为0V，将刺激强度逐步增大刺激坐骨神经，记录肌肉收缩张力结果如下。由图可知：在刺激强度为0.04V-0.05V时肌张力处于基线水平，不能引起肌肉发生收缩反应，为阈下刺激；当电压增加到0.06V时突然出现一个小张力波形，此时肌肉收缩反应出现，说明蟾蜍腓肠肌的阈刺激为0.06V。继续逐步增大刺激强度，可观察到肌肉收缩张力也逐步增大，此时刺激的强度超过阈值，即阈上刺激。逐步增大刺激强度达0.15V后，可发现之后不管如何增大刺激强度，都不再引起肌肉收缩张力增加，而是在最大收缩强度附近波动,即0.15V为能引起最大收缩的最小刺激强度，为最适刺激强度。
由该实验现象可得：0.05V为该蟾蜍坐骨神经的阈下刺激。0.06V为该蟾蜍坐骨神经的阈刺激。0.15V为该蟾蜍坐骨神经-腓肠肌的最适刺激。
3.2不同刺激频率刺激坐骨神经对腓肠肌收缩张力的影响
图3-2蟾蜍骨骼肌串刺激结果图（略）
由该图可知，逐渐增加脉冲次数，当脉冲次数为18时，出现锯齿状的复合收缩曲线；当脉冲次数增加到26时，出现一个相对平滑的高波曲线，幅度比之前的大，继续增大脉冲次数，曲线波形无变化。
因此由该实验结果可知，当脉冲次数增加到18后，出现锯齿状复合收缩曲线，说明出现了不完全强直收缩；当脉冲次数增加到26后，锯齿状的曲线波形变为一个曲线平滑的高波，波形高度更高，说明出现了完全强直收缩。
3.3讨论
3.3.1实验过程需要注意的是：
（1）制作标本时，不能用金属器械碰神经干，以免损坏神经，影响实验后续操作；分离神经要将周围结缔组织剥离干净；不能用力牵拉损伤神经，经常用任氏液润湿神经。
（2）固定张力换能器时，多采用“一维微调固定器”，由上下位置调节钮控制，可在小范围内（上下）精细的移位。这不仅方便了实验操作，也有利于前负荷的控制。
（3）测量的方向，即力与位移的方向，要与张力换能器弹性悬梁的前端上下移动的方向保持一致。使能量转换和线性关系良好，符合张力换能器设计与使用上的要求。
（4）记录肌肉收缩类实验指标时，张力换能器金属弹性悬梁外露的前端向下移位（下拉），收缩曲线为正立的，即肌收缩时，基线上移，舒张时下移，较为符合一般描记观察的习惯。
（5）在使用时不能用手牵拉弹性梁和超量加载。张力换能器的弹性梁屈服极限为规定量程的2～3倍。有经过防水处理，水滴入或渗入换能器内部会造成电路短路，损坏换能器。
（6）换能器与记录仪或生理信号采集处理系统配合使用时，为了精确测量，需要调零和定标（自动平衡类产品不需换能器调零）。
（7）不进行正式记录时，电子刺激器输出应断开，以免不必要的、频繁的刺激；刺激器两输出端不要短路。
（8）用刚能引起肌肉最大收缩的强度刺激，不要刺激过强而损伤神经。当直接刺激神经失效时，可直接刺激肌肉。
3.3.2由图3-1看出，在一定范围内，肌肉的收缩张力和收缩频率（即肌肉收缩性质），与所受刺激的频率和强度有关。即在一定范围内，其他条件不变时，肌肉的收缩张力与刺激强度呈正相关，肌肉的收缩频率与刺激频率呈正相关。若刺激强度低于该范围，则表现为肌肉无反应。分析原因可能是由于一块肌肉由许多肌纤维组成,骨骼肌的收缩受运动神经元的支配。单个运动神经元可支配多根肌纤维，一个运动神经元与它所支配的肌纤维组成一个运动单位。而不同的运动单位兴奋阈值不同。低于阈刺激的刺激强度，神经纤维不发生兴奋，其所支配的肌细胞也不发生反应；因此当刺激电压达到阈强度时，神经干中阈值最低的神经开始兴奋，其所支配的运动单位也兴奋并发生收缩。刺激强度逐渐增大，神经干中兴奋的神经纤维增加，收缩的运动单位也增加，于是骨骼肌收缩张力增加。当刺激电压达到最大刺激强度后，所有的神经纤维都兴奋，其所支配的所有的运动单位也收缩，所有刺激强度再增大。骨骼肌收缩力也不再增加。?
3.3.3由图3-2可以看出，对蟾蜍骨骼肌进行串刺激，逐渐增加脉冲次数，结果图会由数个独立的单峰变成锯齿状复合曲线，再变成一个曲线平滑的高峰。分析原因，可能是蟾蜍腓肠肌在收缩时，肌细胞会相继出现绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期，若在相对不应期或者超常期早期给予细胞另外一个刺激，肌细胞的第一次兴奋正处于舒张期，而新的刺激会使得肌肉发生收缩，以致于肌肉会出现持续收缩的状态，即不完全强直收缩；但若在肌细胞兴奋地低常期或者超常期后期给予一个新的刺激，肌细胞此时正处于收缩状态，新的刺激也会使得细胞收缩，两次收缩效果相叠加，肌肉处于持续最大收缩状态，即完全强直收缩。接着随着刺激频率增加，每次刺激时间间隔逐渐缩短，肌肉收缩的反应可以融合，开始表现为不完全强直收缩，然后变成完全强直收缩。
4.结论
在一定范围内，肌肉的收缩张力和收缩频率（即肌肉收缩性质），与所受刺激的频率和强度有关。即在一定范围内，其他条件不变时，肌肉的收缩张力与刺激强度呈正相关，肌肉的收缩频率与刺激频率呈正相关。若刺激强度低于该范围，则表现为肌肉无反应；若刺激频率超出该范围，则表现为完全或不完全强直收缩。
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